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杂交瘤定义为能够在标准实验室条件下无限期产生抗体的杂交细胞系

发布时间:2022-10-10 点击量:45
  杂交瘤可以定义为能够在标准实验室条件下无限期产生抗体的杂交细胞系。与其他抗体发现方法相比,杂交瘤产生的抗体具有更高的亲和力、稳定性和特异性。
  杂交瘤细胞是如何产生的?
  融合的浆细胞(分泌积极高亲和力抗体)与兼容骨髓瘤伙伴(恶性浆细胞通常从同一机体)分离的杂交瘤细胞系。该过程可以由化学或物理信号(即电信号)介导,并导致这些高产和抗体分泌细胞系的永生化。
  如何选择正确融合的杂交瘤?
  浆细胞与其相应的骨髓瘤伙伴的融合并非 100% 有效。即使在最佳条件和有效的刺激下,细胞融合仍然会产生需要分离的未融合和融合细胞的混合物。
  由于浆细胞寿命短,因此很容易消除它们,但消除未融合的骨髓瘤更为复杂。为了提高选择过程的效率,用于融合的骨髓瘤伴侣缺乏核苷酸补救途径的关键酶 HGPRT。然后将混合物在HAT 培养基(次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖基转移酶)中培养,其中只有具有 HGPRT 酶的细胞(从浆细胞继承 HGPRT 的杂交瘤)才能存活。
  杂交瘤生产的理想抗原是什么?
  成功的杂交瘤生成首先取决于宿主独特的免疫反应。因此,用于免疫的抗原需要引起强烈的体液反应,或者换句话说,它们需要具有免疫原性。并非所有抗原物质(蛋白质、小分子、脂质、碳水化合物、肽)都具有免疫原性。这种能力取决于抗原来源的生物体和用于产生杂交瘤的宿主生物体之间共有的同源性。这两种生物距离越远,宿主对目标目标发起有效免疫反应的机会就越大。
  常用的抗原包括细胞、蛋白质、肽和 DNA。蛋白质和肽是受欢迎的选择,因为它们允许更精确的靶向。通过使用蛋白质,可以迫使杂交瘤中产生的抗体靶向病原体或蛋白质复合物的特定区域。此外,通过使用肽,可以设计杂交瘤以靶向特定表位或严格数量的不同表位。但由于大多数肽没有足够的免疫原性,它们通常与载体(佐剂)结合以确保宿主生物体可以将它们识别为外来物。
  DNA 免疫和细胞免疫(在其表面表达抗原的重组细胞)是处理不稳定或复杂抗原(如 G 蛋白偶联受体 (GPCR) 和其他膜结合蛋白)的首选方法。当抗原呈现对抗体活性起决定性作用的特定翻译后修饰时,也可以使用 DNA 免疫。
  总之,选择正确的抗原不仅取决于其天然结构和来源,还取决于用于产生杂交瘤的宿主的免疫系统。
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